SPR（表面等离子共振）

SPR技术简介

表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance, SPR) 技术实时检测SPR角的变化，而SPR角的变化又反映分子结合和解离过程中传感芯片表面分子质量发生的变化，从而实时地监测分子间的相互作用。

为了研究两个分子之间的相互作用，其中一个分子被固定到芯片表面上（称为Ligand），而另一个分子（称为analyte）以溶液的形式连续流过芯片表面，检测器能实时检测溶液中的analyte分子与芯片表面的Ligand分子结合、解离过程，并以SPR响应值的形式显示。SPR的方法不仅可以检测是否有特异性的结合，还可以通过数据分析软件获得分子间的结合速率常数（association rate constant，ka）、解离速率常数（dissociation rate constant，kd）、平衡解离常数（dissociation equilibrium constant，KD）等参数。

中朊生物提供的SPR技术服务是基于Biacore仪器，我们可以为客户提供快捷高效的分子互作检测服务，包括活性检测、抗体筛选、表位作图、一致性评价和质量控制检测等各种科研服务。

SPR的优势

SPR技术基本原理

SPR降低特定角度反射的光强度，当分子结合到传感器表面时，SPR角随金表面折射率变化而变化，而折射率的变化又与金表面结合的分子质量成正比。传感器、微流控系统和SPR检测器三者共同工作，来检测生物分子的相互作用，对反射指数变化的检测结果构成传感图。

基本分析流程

Biacore的基本分析流程包括：实验设计、固定配体、样品进样、芯片再生、数据分析。

样品要求

案例介绍

（1）利用SPR技术进行抗体筛选

SPR 技术应用与抗体筛选实验

（2）SPR技术进行竞争性结合分析

参考文献：Heparin prevents caspase-11-dependent septic lethality independent of anticoagulant properties
该团队利用SPR技术验证了肝素直接抑制HMGB1与LPS的结合。首先作者通过SPR技术验证了肝素和NAH与HMGB1均有很强的亲和力，亲和力分别5.59*10-6,2.27*10-4。作者又通过SPR技术进一步验证了肝素和NAH均能抑制HMGB1与LPS的结合。

(A) Recombinant HMGB1 proteins were immobilized to the chips. The binding between HMGB1 and heparin (25, 50, 100, 200 μM, from the bottom to top) or NAH (25, 50, 100, 200 μM, form the bottom to top) was assessed by surface plasmon resonance.

(C) Recombinant HMGB1 proteins were immobilized to the chips. The binding between LPS and HMGB1 in the presence or not of heparin (up panel) or NAH (bottom panel) was assessed by surface plasmon resonance.

（3）SPR技术检测小分子与蛋白质结合

（4）SPR技术验证核酸与蛋白质结合

表面等离子共振技术 (SPR) 验证OGT适配体与靶点蛋白的结合